2023年3月17日經國(guo)家市場監督管理總局（國(guo)家標(biao)準化管理委員會）批準發布GB/T 5750-2023《生活(huo)飲用水(shui)標(biao)準檢(jian)驗(yan)方法》系列標(biao)準，代替實施(shi)16年之久的GB/T 5750-2006 《生活(huo)飲用水(shui)標(biao)準檢(jian)驗(yan)方法》。

新標準將于2023年10月1日起正(zheng)式實施。 GB/T 5750-2023標準歷(li)時5年，經過了3輪(lun)意見征求，有280+單(dan)位(wei)參與(yu)研制與(yu)驗證，有超過500名行業專(zhuan)家參與(yu)的GB/T 5750修訂工(gong)作，最(zui)終大功告成(cheng)。

本次修訂微生物(wu)指標(biao)主要內容：新增腸球菌和(he)產(chan)氣莢膜(mo)梭狀芽(ya)孢桿(gan)菌兩個檢測(ce)指標(biao)、3種(zhong)檢測(ce)方(fang)法和(he)增加(jia)菌落總數酶底(di)物(wu)法新方(fang)法。

其中(zhong)產氣(qi)莢(jia)膜梭(suo)狀芽(ya)孢桿(gan)菌是新增檢測指標(biao)，有些老師(shi)不清楚檢測過程(cheng)中(zhong)需要用到哪(na)些設備，我們(men)根(gen)據(ju)標(biao)準的要求做(zuo)個簡單介(jie)紹(shao)。

根據標準(zhun)要求我們需要準(zhun)備以下儀器(qi)和耗(hao)材：

1.  電子(zi)天平：實驗室(shi)常(chang)用儀器

2.  pH計或(huo)精密pH試紙：實驗室常用儀(yi)器或(huo)耗材

3.  恒溫培養(yang)箱：實驗室(shi)常用儀器

4.  冰(bing)箱：實驗室常用儀(yi)器

5.  恒溫水浴箱：實(shi)驗室常用儀器

6.  顯微鏡：實驗室常用儀器

7.  無(wu)菌(jun)吸(xi)管：實(shi)驗(yan)室常(chang)用耗材或(huo)儀(yi)器

8.  無(wu)菌試管：實驗室常用(yong)耗材

9.  無菌平皿：實驗室常用耗材

10. 厭氧培養裝置：華端生物HD-AN系(xi)列智能厭(yan)氧微(wei)需(xu)氧培養系(xi)統

11. 過濾設備：華端(duan)生(sheng)物HD-F系列水中微生(sheng)物膜過濾裝置(zhi)

12. 濾膜:實(shi)驗(yan)室常用耗材

13. 無齒鑷子：實(shi)驗(yan)室常用耗材

其他會用到的設備：HD-C系(xi)列菌落計數儀、HD-DT系(xi)列自(zi)(zi)動(dong)樣品稀釋儀、HD-GM系(xi)列全自(zi)(zi)動(dong)革蘭氏染色儀、HD-S系(xi)列自(zi)(zi)動(dong)培養基分裝儀、HD-MA系(xi)列自(zi)(zi)動(dong)微生物生化鑒定系(xi)統

產(chan)氣莢膜(mo)梭狀芽(ya)孢桿(gan)菌檢測流程(cheng)圖

一、 樣(yang)品(pin)

1. 污染較(jiao)輕的水樣(yang)，可直接取(qu)100 ml水樣(yang)進行檢(jian)驗。

2. 污染嚴重的水樣(yang)，可使用0.1%緩(huan)沖(chong)蛋白(bai)胨水將(jiang)水樣(yang)按(an)10倍系列(lie)稀釋，取100ml進行檢驗(yan)。

使用華(hua)端生物HD-DT系(xi)列自動樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)儀：自動(dong)稱重，自動(dong)按比例稀釋。

二、 過濾水樣

先用無(wu)菌(jun)鑷(nie)子夾取無(wu)菌(jun)濾(lv)(lv)膜(mo)邊緣(yuan)部分，將濾(lv)(lv)膜(mo)正面朝上貼放在(zai)已滅菌(jun)的濾(lv)(lv)床上，固定好濾(lv)(lv)器，將100 ml水樣注入濾(lv)(lv)器中，打開濾(lv)(lv)器閥門，在(zai)-5.07X104Pa(-0.5 個大氣壓)下(xia)抽濾(lv)(lv)。每次試驗均需要用100 mL0.1%緩沖蛋白胨水講行空(kong)白對照(zhao)。

使用華(hua)端生物HD-F系列水中微(wei)生物膜過濾裝置：配備直排(pai)泵，無需廢(fei)液(ye)瓶，直排(pai)廢(fei)液(ye)；火焰滅菌支架(jia)和濾杯，提高實驗效率。

三、厭氧培養

過(guo)濾完水樣后，關上濾器閥門，取(qu)下濾器，用無(wu)菌鑷子夾取(qu)濾膜邊緣(yuan)部(bu)分，移(yi)濾膜倒置(zhi)在SPS瓊脂培(pei)(pei)養基上，濾膜截(jie)留細菌面與培(pei)(pei)養基貼緊，避免氣(qi)泡產生(sheng)，然后將平皿倒置(zhi)于厭(yan)氧培(pei)(pei)養裝置(zhi)內，于36℃±1℃厭(yan)氧培(pei)(pei)養18 h~ h，計數(shu)黑色菌落數(shu)。

使用華端生物HD-AN系列智能厭氧(yang)(yang)微需氧(yang)(yang)培養系統：使用靈活(huo)、成本低，培(pei)養效(xiao)果有保障，操(cao)作(zuo)簡單、智能(neng)。

四、 菌落(luo)計數(shu)

對濾膜上證(zheng)實為產氣(qi)莢膜梭狀芽孢桿菌(jun)的菌(jun)落(luo)進行(xing)計數

使用華端生物HD-C系列菌落計數儀：手動菌落計數器輔助計數，操作方便；全自動菌落計(ji)數儀：軟件(jian)自動計數，計數快捷(jie)、準確。

五、 細菌鑒定(ding)

用上(shang)述培養液涂片(pian)，革(ge)蘭氏(shi)染色、鏡檢(jian)。產氣莢膜(mo)梭狀(zhuang)芽孢(bao)桿菌(jun)(jun)為(wei)革(ge)蘭陽性粗大桿菌(jun)(jun)，其(qi)耐熱(re)菌(jun)(jun)株可能形(xing)成(cheng)卵形(xing)芽抱,位于(yu)菌(jun)(jun)體中央或近(jin)端，其(qi)寬(kuan)(kuan)度一般不超(chao)過菌(jun)(jun)體寬(kuan)(kuan)度。

使用華端生物HD-GM系列全自動革(ge)蘭氏染(ran)色儀(yi)：自(zi)動(dong)化的(de)染(ran)色(se)儀使革蘭氏(shi)染(ran)色(se)實驗自(zi)動(dong)化、標準化，批量(liang)大時可節約大量(liang)時間(jian)。

使用華(hua)端生(sheng)(sheng)物(wu)HD-MA系(xi)(xi)列自動微生(sheng)(sheng)物(wu)生(sheng)(sheng)化鑒定系(xi)(xi)統：標準化(hua)的試劑操作，儀器(qi)自動判讀結果，避免人工判讀偏差。

六、 其(qi)他儀器

使用華端(duan)生物HD-S系列自動培養(yang)基(ji)分(fen)裝儀(yi)：自動分(fen)裝培(pei)養基或者其他(ta)微生物(wu)試劑，方(fang)便、快速。

使用華端生物(wu)HD-M系列(lie)微(wei)生物(wu)質譜快速鑒(jian)定儀：相比傳統(tong)鑒(jian)定方式更(geng)(geng)快出結果、準確(que)性更(geng)(geng)高、操作(zuo)更(geng)(geng)簡單(dan)、檢測范圍更(geng)(geng)廣。

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